发布时间:2023-09-28 10:12:27
序言:作为思想的载体和知识的探索者,写作是一种独特的艺术,我们为您准备了不同风格的5篇医学影像技术技能,期待它们能激发您的灵感。
中图分类号:G712 文献标识码:C DOI:10.3969/j.issn.1672-8181.2014.04.115
北海市卫生学校(原北海市合浦卫生学校)始建于1958年,属卫生行业主管公立中等职业学校,是国家级重点中等职业学校和广西示范性中等职业学校。2007年学校被自治区卫生厅确认为广西第三批全科医学教育理论教学培训基地,附属医院确认为临床技能培训基地。2012年学校被教育部、财政部、人力资源和社会保障部批准为第三批“国家中等职业教育改革发展示范学校”立项建设单位,医学影像技术专业是重点建设专业,附属医院是临床实践技能实训基地作为特色项目重点建设。北海市卫生学校附属医院既是师生参加社会和技能实践的重要实训基地,也是对应卫生产业的经济实体。多年来,附属医院为保障人民身体健康服务地方经济作出贡献。
我校医学影像技术专业1975年开办,具有四十多年办学经验,初期称为放射医士专业,进入新世纪后一系列的教学改革和创新,医学影像技术专业已经发展成为我校的特色重点专业,2005年被广西自治区教育厅认定为全区中等职业教育示范专业,2013年我校中等职业教育医学影像技术实训基地建设项目竣工并顺利通过广西自治区教育厅验收。我校医学影像技术专业年招生人数较多(250人/年),在校生规模较大(686人)的专业,培养了广西医学会影像技术委员会主任李文美、副主任钟易等一大批区内该专业杰出学者、专家和技术人才,据统计,全广西大部分医院县市级放射科主任和副主任均为我校该专业毕业生。
北海市卫生学校始终把卫生中等职业教育和医疗服务协调发展、互相促进作为学校的办学特色和基本方略,教产结合是学校提高教学质量和医疗服务质量重要的抓手。医学影像技术专业需要X线机、DR、CT和超声等大型医疗设备作为教学设备,不但价格昂贵,而且人员和环境要求高,诊断治疗和技术操作人员准入认证、人员防护、环境防护以及患者防护等都非常严格,如果没有附属医院作为临床实训基地依托,实行教产结合,这些大型医疗设备就单纯作为示教教具,必定造成资源浪费,生均教学设备均费用很高,学校难以维持运转。反之,如果以附属医院作为临床实训基地依托,实行教产结合,学校对附属医院实行一体化管理体制,不断完善医学教育功能和医疗服务功能,一方面开展医学应用性技术的研究和开发,提高大型教学设备的使用效益,降低了教学投入成本,增强了学校经济实力;另一方面教产结合的收益除满足附属医院的发展外,还投入到学校的基础设施建设中。附属医院作为师生参加社会和技能实践的重要实训基地建设,附属医院的建设和发展壮大,就能很好地展示学生日后将从事的卫生职业前景,起榜样示范作用[3-4]。
1 建设工学结合和顶岗实习实训教学硬件
学校附属医院是一所集医疗、教学、培训、科研四位一体的国家二级甲等综合医院,设置有门诊部、急诊科、内科、外科、妇产科、儿科、五官科、口腔科、麻醉科、中医科、理疗科、感染性疾病科等业务;医技部门开设药剂科、放射科、CT室、超声诊断科、心电图室、脑电图室、胃镜室、病理科等科室,开设病床数336张。附属医院加强与医学影像技术等办学专业的实训基地相关建设,建好示教室和所有实习生值班室,安装了超声诊断科教学闭路电视录制和转播系统,完善医学影像PACS系统,真实的医疗服务场景和卫生职业服务流程等为师生参加实践训练提供保证。还新建了两个各拥有30台计算机,配备投影设备的医学影像诊断一体化实训室,新建了每个拥有8套先进B超设备、电脑捕获实时图像可大屏幕投影演示的超声诊断实训室,各科室均安装多媒体大屏幕投影并连接校园网,可随时调用包括附属医院实时CT、DR、超声影像等网络资源中心的教学资源上课,这一系列的建设投入有力地保证了一体化教学的实施,也保证了学生充分实践的机会。
2 改革实训实习课程和创新实训实习管理
以附属医院为依托,学校率先中职学校中应用问题教学法等现代先进教学方法,推行“理实一体化”教学模式,按“模块化”教学,完善阶段实习教学计划和实施方法、重新编写实习生手册,优化和量化阶段2周阶段见习和顶岗实习教学计划和实施方法,完善实习管理相关制度教学模式,实施2周阶段见习和顶岗实习。以附属医院为依托,教产结合,学校创新教学方法,让部分专业课教学在附属医院实施,通过工学结合,改变原来单纯理论教学后再实验的教学方法,引入“导生制”、“助教”教学手段,创新教学方法,全面提高学生的实际操作能力和技能水平[4-5]。以附属医院为依托,教产结合,学校在完善校际共享、校企共享、师生共享、满足专业发展需要的教学资源库,构建以岗位能力职业准入和职业发展为目标、以工作过程和工作任务为导向的课程体系,创新“校企合作、工学结合、顶岗实习”的人才培养模式等方面的取得进展。
3 建设双师型师资队伍
学校重视“双师型”师资队伍的建设,教产结合,增强教师动手能力、知识传授能力、现场指导能力等,不断优化教师队伍的结构。学校建立附属医院专业人员教学轮岗和兼课机制。制定相关制度激励专业人员承担实践教学任务与获取教师资格证书和中职教师系列职称,采取双职(教研室主任、附属医院放射科、CT室、超声诊断科和心电图室等业务科室主任)或挂职的措施,培养学校专业带头人和骨干教师。教师担任附院科主任和兼职教学工作,充分发挥其潜能,认真做好教学工作和医疗服务,以其丰富的专业知识和教学临床经验、优良的教学效果和突出的科研能力获得社会和学校师生的一致好评。教师不仅熟悉操作过程,而且精通原理,并能教会学生;教师不仅将生产、管理、服务知识应用于生产,而且将这些知识能有效地再现、传授给学生。以附属医院为依托,教师应用问题教学法培养学生综合运用知识能力,教师更好地了解学生,提高自身素质,很好地顺应教学方法改革的要求,一方面,大大提高教师自身的动手与实践能力、生产实际问题的解决与分析能力、指导实训与现场教学能力;另一方面,大大提高学生实践技能水平,同时提高教学效率,探求改革课程和提高教学效果的有效途径,实现培养实用型卫生人才的目标[4-5]。学校医学影像技术专业现拥有具备教师专业技术职称又具备卫生专业技术职称的“双师型”教师二十多人,教师实现了从传统经验型教师向现代学者型、反思型、研究型教师转变。。
4 改革学生评价模式
传统的医学影像技术专业学生评价模式较笼统,专业条块分割,无细化和量化标准,难以实现与岗位所需的技能对接。以附属医院为依托,教产结合,重新制订实习生出科成绩评定办法和实成绩评定办法,建立较为科学合理的医学影像技术专业实习生和评价标准,建立以能力为核心的医学影像技术专业学生综合评价模式。学生要掌握多门知识,还要掌握本专业职业岗位的知识、技能和技术。同时,也要掌握相关专业、行业的知识、技能、技术,并能将各种知识、技能、技术相互渗透、融合和转化,因此我们以职业道德和职业能力为标准,以横向为主的模块式课程体系,强调的是职业岗位、技术的专项性、操作性和应用性,学校通过对该专业技能操作岗位细分,制定了X线摄影技术、肝胆超声扫描技术、心电图检查技术等专业技能考核评分标准。组织实施专业技能操作考核,通过这些考核,对学生实施客观、标准的量化考核,保证医学影像技术专业学生能力培养的质量。学校还举办全校医学影像专业技能操作比赛,激励学生参加实训兴趣的积极性。学校还建立以理论考、实验考、实训考、用人单位考和毕业生质量跟踪调查评价为主的综合评价模式[3-6]。
5 改进人才培养模式
医学影像技术专业具有联系实际、知能并重和启发诱导等特点,理论和实践结合紧密又不乏高深的理论,而且有很强的实践性[3-4]。课程设置为培养目标服务、教学内容为专业服务、理论系统为操作实践服务,突出能力的培养。以附属医院为依托,教产结合,通过真实病例、实际工作场景和仪器操作,教学具富有能动性和创造性,有效加强学生理论联系实际,有效将书本理论知识转化为现实工作能力。为节约教学时间,保证学生充分实践,我校大力推进医学影像专业课程实施一体化教学,教师在教学过程中充分利用医学影像网络教学资源中心的资源,贯彻多媒体视图直观教学、多图纵横对比、理论与实践高度结合、精讲多练、调动学生参与等教学原则。学校加大投入,增加了超声诊断学课时和增开心电图诊断学课程。传统的教学大纲、教学计划比较笼统,各学科课程条块分割,难以实现以岗位所需的能力对接[3-5]。传统的教学大纲专业课程设置超声诊断仅安排72学时,只能达到让学生了解的水平, 因此要真正达到熟练的层次必须依托附属医院,增加医学影像技术专业课时,尤其是实训课时,我校实施的教学计划中超声诊断学调整为144学时,理论实践比为1:1。传统的教学大纲中无心电图诊断学教学要求,因为该门技术在基层已经普及应用,我校在选修课程模块中安排114课时[7]。通过教产结合,医学影像专业课程实施一体化教学,教师在教学过程中充分利用医学影像网络教学资源中心的资源,贯彻多媒体视图直观教学、多图纵横对比,不但提高了学生学习的主动性,克服从模具、课堂练习转为真实人体操作和实际场景的恐惧心理,而且方便了在校生及早接触社会,贴近岗位。制订完善新的教学大纲、教学计划(草案),创新教产一体的人才培养模式,制定医学影像专业新课程表,完成效果评价报告,构建模块化和以工作任务为中心的课程体系,完善“教产一体、工学结合”人才培养模式。由于我校医学影像技术专业毕业生只要一人当班即可同时兼X线、超声和心电图仪器操作和常见病看图诊断工作,实际操作能力强,深受乡镇医院和社区医院的欢迎,很多在实习阶段学生就与用人单位签订了工作合同,近年来医学影像技术专业当年对口就业率达到了95.4%。[5-7]
随着我国基层医疗卫生事业迅速发展,农村新型合作医疗和城市社区卫生服务网点大量增多,规模扩大,设备更新,大多配备了X线、超声、心电图等辅助诊断设备,基层医学影像专业人才需求量明显增加。今后我们将紧紧抓住国家实施医药卫生体制改革和建设国家中等职业教育改革发展示范学校的机遇,产教结合,加大投入,促进作为临床实践技能实训基地的附属医院的规模进一步扩大、医疗服务质量进一步提高、教育教学功能进一步完善,促进医学影像技术专业进一步发展,充分发挥我校医学影像专业的办学优势,培养更多胜任基层卫生服务的医学影像技术专业人才,充分体现卫生职业教育的功能,彰显示范校的特色,造福百姓。
参考文献:
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[5]肖智谦,陈碧瑕,刘伟等.以问题为中心的教学模式在卫生职校的应用[J].广西教育,2009,(18):39-41.
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[7]刘伟,肖智谦,邱琼华.电图诊断视图直观加问题驱动教学法实践初探[J].卫生职业教育,2011,29(8):76-77.
作者简介:肖智谦(1968-),男,汉族,广西合浦人,医学硕士,临床医学高级讲师,副主任医师,北海市卫生学校附属医院院长,国家执业医师临床实践技能考试考官,连续从事中职卫校教学二十多年,是中国职业院校教学名师,广西北海 536000
林斯文,北海市卫生学校,广西北海 536000
【摘要】 目的观察并比较独一味和吡拉西坦对小鼠学习记忆能力的影响。方法以东莨菪碱和乙醇分别造成小鼠学习记忆获得障碍和记忆再现障碍,采用迷津法和跳台法进行观察。结果独一味提取物(0.5 g·kg-1和1.0 g·kg-1)及吡拉西坦(0.2 g·kg-1)均可使小鼠逃避伤害刺激的反应速度加快,错误次数明显减少,遭电击时间缩短(与模型组比较,0.01<P<0.05),两药的效果相近(P>0.05)。结论独一味对小鼠的学习和记忆障碍有改善作用,其作用机制有待进一步研究。
【关键词】 独一味;吡拉西坦;记忆获得障碍;记忆再现障碍
Abstract:ObjectiveTo observe the effects of Herba Lamiophlomis on learning and memory ability of mice. MethodsThe models of aquired dysmnesia and reproduction memory disorders were established by scopolamine and alcohol,and the effects of Herba Lamiophlomis and piracetam on learning and memory ability were observed and compared.ResultsThe Herba Lamiophlomis aqueous extract at the dose of 0.5 g·kg-1 and 1.0 g·kg-1 could reduce the error times,prolong the latent period and shorten total time of lightning stroke.There was a significant difference between the Herba Lamiophlomis and model group ( P<0.05).While there was no significant difference between the Herba Lamiophlomis and piracetam ( P>0.05). ConclusionHerba Lamiophlomis can obviously improve learning and memory ability of mice.
Key words:Herba Lamiophlomis; Piracetam; Aquired dysmnesia; Reproduction memory disorders
独一味Lamiophlomis rotata(Benth.)Kudo系唇形科无茎多年生草本植物,以全草或根及根状茎入药,是藏、蒙、纳西等民族常用草药。从独一味的地上部分及根中分离得到黄酮类、环烯醚萜类和苯乙醇苷类等多种化学成分[1,2]。研究表明,独一味具有活血化瘀、镇痛、止血、消肿、抗炎等作用[3,4]。独一味胶囊用于各种疼痛、止血等取得了满意的疗效[5~7]。但独一味对行为障碍的影响未见报道。本实验采用东莨菪碱和乙醇致小鼠学习记忆障碍,采用迷津法和跳台法观察并比较独一味提取物和吡拉西坦对学习记忆能力的影响。
1 材料
1.1 动物
昆明种小鼠,体重17~23 g,雌雄兼用,由天津市实验动物中心提供,合格证号为SCXK津2005-0001。
1.2 药品
独一味,产地甘肃,由本校天然药物化学实验室提取;吡拉西坦,天津金世制药有限公司生产,批号 20071027;氢溴酸东莨菪碱,上海禾丰制药有限公司生产,批号 061101;无水乙醇,天津市华东试剂厂生产,批号 20061124。
1.3 仪器
MG-2型迷津刺激器,张家港市生物医学仪器厂生产;ZH-50型小鼠跳台刺激仪,安徽淮北正华生物仪器有限公司生产。
2 方法与结果
2.1 独一味提取物的制备[7]
取独一味粉碎,加水煎煮3次,1 h/次。合并煎液,过滤,将滤液浓缩并在80℃以下干燥成棕色粉末。用时用蒸馏水稀释至所需浓度,保存于冰箱。
2.2 独一味对东莨菪碱致记忆获得障碍小鼠学习记忆能力的影响
2.2.1 迷津法[8]
用小鼠Y型迷宫进行实验。选健康成年昆明小鼠60只,体重(19.8±1.5)g,雌雄各半,随机分成5组。1组,对照组;2组,模型组;3组,吡拉西坦组(0.2 g·kg-1);4组,独一味低剂量组(0.5 g·kg-1);5组,独一味高剂量组(1.0 g·kg-1)组。各组均灌胃给药,1组及2组给生理盐水,容量均为10 ml·kg-1,1次/d,连续14 d。于第13天上午给药后1 h开始训练。训练前10 min,1组腹腔注对生理盐水,其余各组小鼠均腹腔注射氢溴酸东莨菪碱(1.5 mg·kg-1)。训练时先将小鼠放于起步区适应2 min,然后通电(40 V交流电),动物受到电击后直接逃至安全区为正确反应,逃至电击区为错误反应。如此训练15次,记录正确反应与错误反应次数。24 h后进行测试,观察指标及方法同训练时。结果以±s表示,通过t检验比较两组间差异的显著性。结果见表1。表1 迷津法观察独一味对东莨菪碱所致小鼠学习记忆障碍的改善作用(略)
结果显示,独一味能明显减少小鼠错误反应次数,改善小鼠由东莨菪碱所致的学习及记忆获得障碍。
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2.2.2 跳台法[8]
选健康成年昆明小鼠60只,体重(20.3±2.3) g,雌雄各半,随机分成5组。分组方法及给药方法同“2.2.1”项。于第13天上午给药后1 h开始训练,训练前10 min,1组腹腔注对生理盐水,其余各组均腹腔注射氢溴酸东莨菪碱(1.5 mg·kg-1)。训练时先将小鼠放入跳台反射箱内适应3 min,然后通电(36 V),小鼠受到电击后正常反应为跳上跳台,逃避电击,跳下台时小鼠双足同时接触铜栅触电,视为错误反应。训练5 min,并记录小鼠逃避电击首次跳上跳台的时间(反应阈)、5 min内触电次数(错误次数)及5 min内累加触电时间(错误反应时间)作为学习成绩。24 h后重新测试,测试时先将小鼠放于跳台上,同时记时,记录小鼠第一次跳下跳台的时间,此期间为触电潜伏期,并记录5 min内小鼠的错误反应次数及累加触电时间作为记忆成绩。结果以±s表示,通过t检验比较两组间差异的显著性。结果见表2。表2 跳台法观察独一味对东莨菪碱所致小鼠学习记忆障碍的改善作用(略)
结果显示,独一味能明显缩短小鼠逃避电击的时间,减少错误反应的次数,缩短触电时间,并明显延长了测试时跳台上的停留时间(潜伏期)。
2.3 独一味对乙醇所致的记忆再现障碍小鼠学习记忆能力的影响
采用小鼠迷津法进行实验。选健康成年昆明小鼠60只,体重(19.5±1.4)g,雌雄各半,随机分成5组。分组方法及给药法方法同“2.2.1”项。于第13天上午给药后1 h开始训练。训练方法及观察指标同“2.2.1”项。24 h后进行测试。测试前15 min, 1组灌胃生理盐水,其余各组小鼠均灌胃35%乙醇,容量为0.1 ml·10 g-1,造成动物记忆再现障碍。测试方法及数据处理方法同“2.2.1”项。结果见表3。表3 独一味对乙醇所致记忆再现障碍小鼠学习记忆能力的影响(略)
结果显示,35%乙醇能明显降低小鼠的记忆再现能力,使错误反应次数增多。吡拉西坦和独一味均能减轻这种损伤,使学习能力有所增强,记忆再现障碍得到明显改善。
3 讨论
学习过程是由广泛的神经元群的共同活动来完成的,反复的刺激使脑细胞的活动在时间上和空间上发生构型的变化,细胞间的联系更加容易,使学习的信息得到巩固而形成记忆。
学习和记忆是一个极其复杂的生理生化过程,其影响因素很多。首先,中枢递质与学习记忆活动有关,拟胆碱药可加强记忆活动,而抗胆碱药东莨菪碱则能使学习记忆功能减退;其次,中枢神经系统的基本功能—兴奋与抑制是影响学习记忆的一个重要因素。中枢的过度抑制会使学习记忆能力下降,高浓度乙醇会作用于大脑及小脑,抑制中枢,产生近记忆力丧失,时空定向力障碍,共济失调等。
该实验采用东莨菪碱和乙醇分别造成小鼠学习记忆获得障碍和记忆再现障碍,增加动物的错误反应次数及反应时间。模型组与空白组比较,均P<0.05。吡拉西坦是促思维记忆药,用于脑血管疾病,神经外科手术后等已有多年,实验中比较了独一味与吡拉西坦对小鼠学习记忆能力的影响。
研究表明,独一味对东莨菪碱及乙醇所致的学习及记忆障碍均有明显的改善作用(与模型组比较,均P<0.05),其效果与吡拉西坦相近(P>0.05)。独一味改善学习记忆能力的作用可能与其活血化瘀,从而改善脑组织的血液供给有关。其确切作用机制还有待进一步研究。
【参考文献】
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[关键词] 自体输血;异体输血;胃癌;炎性因子;免疫功能
[中图分类号] R5 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742(2016)02(a)-0106-02
Effect of Autogeneic or Allogeneic Transfusion on Inflammatory Factor and Immunologic Function in Patients with Radical Operation for Carcinoma of Stomach
LUO Yun, WANG Hong-mei
Blood Transfusion Department, The people s Hospital of Taixing of Jiangsu Province, Taixing, Jiangsu Province,225400 China
[Abstract] Objective To research the effect of autogeneic or allogeneic transfusion on inflammatory factor and immunologic function in patients with radical operation for carcinoma of stomach. Methods 96 cases of early gastric cancer patients receiving the radical operation for carcinoma of stomach in our hospital from June 2012 to August 2014 were selected and randomly divided into the autogeneic group and the allogeneic group with 48 cases in each, the allogeneic group were transfused with allogeneic whole blood, the autogeneic group were transfused with autologous blood, the natural killer (NK cells), proleulzin(IL-2)and T lymphocyte subsets level(CD3+、CD4+、CD4+/CD8+)of the two groups before and after operation were compared. Results The NK cells and IL-2 of the two groups at the same day after operation were obviously decreased compared with those before operation,(P
[Key words] Autogeneic transfusion; Allogeneic transfusion; Gastric cancer; Inflammatory factor; Immunologic function
胃癌是源于胃黏膜上皮细胞的恶性肿瘤,患者早期可无任何体征,中晚期常见上腹压痛及肿块,晚期患者会出现贫血、消瘦、营养不良甚至恶病质等表现[1-2]。由于胃癌的恶性程度较高,手术切除是根治早期胃癌的唯一方法[3],该研究2012年6月―2014年8月临床观察96例在该院接受胃癌根治术的患者,旨在探讨自体、异体输血对患者炎性因子及免疫功能的影响,现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
整群抽选2012年6月―2014年8月就诊于该院的早期胃癌患者96例,所有患者均经临床诊断及X线、腹部超声、胃镜等相关检查确诊,且自愿在该院接受根治术治疗,排除伴有心、肝、肾其他严重疾病及免疫性疾病者,排除精神、意识障碍不能配合研究者,排除有放、化疗和激素治疗史患者,排除不签署知情同意书者。且该研究经该院伦理委员会审核批准。上述96例患者按照随机法将其分为自体组(n=48)和异体组(n=48),自体组中男30例,女18例,年龄34~68岁,平均(46.5±6.2)岁;体重53~79 kg,平均(66.3±5.4)kg;异体组中男29例,女19例,年龄35~67岁,平均(47.2±7.1)岁;体重52~79 kg,平均(68.4±5.1)kg,两组患者在基线资料方面比较差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。
1.2 方法
所有患者在该院接受根治性手术,术前明确肿瘤部位、大小,制定手术方案,上腹正中切口,探查清除后切除病胃、重建消化道,术毕。两组患者麻醉、手术方式相同,异体组术中输异体全血400~600 mL,自体组麻醉后术前经桡动脉放血400~600 mL,并静脉输入同等6%羟乙基淀粉(国药准字H2006436),术毕将自体血输回。
1.3 观察指标
分别于术前、术后当天及术后7 d取患者清晨静脉血,检测自然杀伤细胞(NK细胞)、白介素-2(IL-2)及T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD4+/CD8+)水平。
1.4 统计方法
采用SPSS 17.0统计学软件分析研究数据,计量资料以均值±标准差(x±s)表示,行t检验,P
2 结果
2.1 炎性因子
术后当天两组患者NK细胞、IL-2较术前显著下降(P
表1 两组患者手术前、后NK细胞及IL-2水平比较(x±s)
注:①与术前比较,P
2.2 疫功能指标比较
术后当天两组T淋巴细胞亚群各指标均显著下降(P
3 讨论
早期胃癌行根治性切除术是目前唯一治愈手段,术后5年生存率达80%以上[4]。但肿瘤患者围术期输血对其预后及5年生存率具有一定的消极影响[5]。由于血液是多种成分组成的混合物,可与机体免疫系统发生相互作用,诱发受血者免疫功能抑制,促进肿瘤细胞的生长,使肿瘤复发[6]。
有研究[7]显示围术期胃癌患者输注异体红细胞会影响其细胞免疫功能。IL-2具有免疫增强作用,参与B细胞激活、增殖,输血后T细胞产生IL-2减少,IL-2功能降低,B细胞激活和抗体产生减少、NK细胞功能不全,导致机体免疫功能抑制。因此,临床应严格执行输血标准,减少不必要的输血。该研究中异体输血组术后当天IL-2水平显著下降,且明显低于自体输血组,术后7 d异体输血组NK细胞水平也显著低于自体输血组。异体输血对患者免疫功能影响较大。且自体组术后7 d T淋巴细胞亚群指标恢复到术前水平,而异体组CD3+(60.3±11.2)%、CD4+(30.4±6.2)%、CD4+/CD8+(0.88±0.25)显著少于自体组。可见自体输血1周后患者免疫功能渐渐恢复,而异体组则出现了较长时间免疫功能抑制。
综上,胃癌患者自体输血较异体输血对患者免疫功能影响小,值得推广。
[参考文献]
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关键词: 血管性痴呆;穴位埋线;学习记忆能力;抗凋亡因子;凋亡
中图分类号: R245.0 文献标志码 :A
文章编号 :1007-2349(2014)01-0059-03
血管性痴呆(vascular dementia,VD)是由一系列脑血管因素(缺血、出血、急慢性缺氧性脑血管病等)导致脑组织损害引起的以认知功能障碍为特征的痴呆综合征[1],已成为威胁高龄人群生命的疾病之一。细胞凋亡是血管性认知功能损害重要的病理生理机制,认知功能损害程度与细胞凋亡有着直接的联系。目前细胞凋亡在脑血管病发病机制中受到重视,多种细胞因子作为启动因素引起缺血性脑损伤。Livin是近年发现的凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis protein family,IAPs)家族新成员,具有较强的抗凋亡活性。本研究制备VD大鼠模型,采用穴位埋线治疗,观察VD大鼠血清Livin水平,探讨穴位埋线治疗VD的可能机制,为临床治疗VD提供一定的实验依据。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物 健康雄性SD大鼠70只,体重280~300 g,清洁级,由重庆滕鑫比尔实验动物销售有限公司提供,许可证号:SCXK(渝)2007-0006。
1.1.2 实验器材 可吸收性外科缝线(经络疏通专用线)(中国中医研究院众益科技开发公司);电子天平(苏州精密仪器厂);DigBehv Morris 水迷宫视频分析系统(上海吉量软件科技有限公司);微型动脉夹(安徽淮北正华生物仪器设备有限公司);SDQ-30双极射频电凝器(苏州手术器械厂);一次性1mL注射针头、一次性5mL注射针头(江西洪达医疗器械集团有限公司)。
1.1.3 药品与试剂 水合氯醛、4%多聚甲醛、兔抗大鼠Livin抗体(美国R&D Systems 公司生产)检测试剂盒(贵州平生生物技术有限公司提供)、尼莫地平片(正大青春宝药业有限公司生产,批号:0801002)。
1.2 方法
1.2.1 VD大鼠模型的建立 将大鼠随机分为假手术组、VD模型组、穴位埋线组和尼莫地平组,采用改良的Pulsinelli’s四血管阻断法(four-vessel occlusion,4-VO)建立VD大鼠模型[2]。模型制作成功标准:大鼠在4条血管阻断后1-2 min内,翻正反射消失,虹膜变白及瞳孔散大。
1.2.2 治疗方法 术后第7天开始治疗,除穴位埋线组外,其余各组治疗均在每天上午9:00~11:00进行,每日1次,连续治疗15 d。
1.2.2.1 穴位埋线组 穴位选择:百会、膈俞、气海、三阴交、膻中。穴位定位:以《实验针灸学》定位位置为标准[3]。治疗方法:将可吸收性外科缝线(4~0号)剪成2 mm小段若干,放在已消毒纸上备用。使用时用镊子将其装入1 mL的注射针头,然后再将预先剪去针尖的针灸针作为针芯穿入注射针头内,组成一套埋线工具。埋线时,先以碘酒消毒,乙醇脱碘后,将注射针头刺入穴位,然后抵住针灸针针尾作注射状,迅速将针头内的羊肠线推入穴内,感觉注射针内有空虚感时方可出针,并确认羊肠线已埋入穴位内。
1.2.2.2 尼莫地平组 按20 mg/(kg・d)的用量进行灌胃治疗。
1.2.2.3 假手术组、VD模型组均给予蒸馏水1 mL/100 g灌胃。
1.2.3 Morris 水迷宫学习记忆能力检测[4]各组大鼠于术后第28 d开始水迷宫测试。Morris水迷宫为圆形水池,直径100 cm,深50 cm,水深30 cm,水温(24±2)℃,池壁上4个等距离点分水池为四个象限,选第三象限在其中央放置平台,平台无色透明,直径6 cm,高28 cm,平台没于水面下2 cm,水池周围参照物保持不变。第1~6 d进行定向航行实验,每日将大鼠按Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ象限的顺序从各入水点(各象限水池壁中点)靠池壁放入水中,记录60 s内大鼠从水中爬上站台所需时间为逃避潜伏期;第7 d行空间探索实验,将大鼠从第Ⅰ象限入水点放入水池,记录2 min内大鼠在第Ⅲ象限游泳时间和穿越站台次数。
1.2.4 血清采集及检测 Morris 水迷宫检测之后,于腹股沟处切开皮肤,剪断股动脉采集血液,入冰箱静置过夜后采集血清以备进行Livin含量检测。开颅取脑,取海马组织固定12 h。经梯度酒精脱水、透明、浸蜡、包埋后,连续冠状切片(片厚5 um)。苏木素-伊红(HE)染色,光镜下观察海马神经元的病理变化。
1.2.5 图像分析及统计学处理 用Biomias99图像分析系统进行图像分析。实验数据用SPSS12.0统计软件进行单因素方差分析,组间差异比较采用SNK检验,统计结果以以表示。
2 结果
2.1 穴位埋线对VD大鼠Morris水迷宫的影响
2.1.1 定位航行实验 平均逃避潜伏期反映大鼠的学习能力。模型组大鼠平均逃避潜伏期与假手术组比较明显延长(P
2.1.2 空间探索实验 该实验反映了大鼠的记忆能力。VD模型组与假手术组比较,第Ⅲ象限活动时间缩短、穿越站台次数减少(P
2.2 穴位埋线对VD大鼠血清livin含量的影响 VD模型组大鼠血清Livin含量比假手术组显著降低(P
2.3 穴位埋线对VD大鼠病理形态学的影响 HE染色见假手术组大鼠海马CA1区神经元排列整齐、密集,无变性、坏死和肿胀细胞结构正常,胞浆丰富,无胶质细胞增生现象;细胞核呈圆形、椭圆形。(见Fig.1图A);VD模型组海马组织明显水肿,血管扩张充血,并见严重的神经元肿胀、变性及坏死,神经纤维增粗紊乱。(见Fig.1图B);穴位埋线组海马CA1区现轻微水肿、血管扩张充血,神经元出现肿胀及变性,未见神经元排列紊乱和坏死。(见Fig.1图C);尼莫地平组海马CA1区神经元密集,出现轻微水肿和血管扩张充血,神经元现轻微肿胀和变性,未见神经元排列紊乱和坏死,神经纤维现增粗紊乱。(见Fig.1图D)。
3 讨论
近年来的研究表明,脑缺血可引起脑神经细胞凋亡及其相关基因的表达,并认为细胞凋亡在缺血损伤中起重要作用。越来越多的证据表明:基因调控与细胞凋亡有关。影响细胞凋亡的基因按其表达物对凋亡过程的作用大致可分为两类:存活基因和致死基因。Livin是一种新近发现的抗细胞凋亡因子,以其为靶点的抑制物及反义Livin能够保护细胞不进行凋亡[5]。还有报道称Livin能够作用于细胞凋亡线粒体通路,发挥抑制细胞凋亡的作用[6]。抑制凋亡的的机制主要通过:抑制Caspasep途径、激活TAK1/JNK1信号传导途径来实现[5]。谭家泽等[7]通过对Livin检测显示VD患者Livin含量降低,提示Livin低表达参与了VD的细胞凋亡进程。张益等[8]对大鼠脑缺血再灌注脑组织Livin表达的研究显示,假手术组、正常组Livin阳性细胞数量极低,模型组Livin阳性细胞数明显增加,治疗后,Livin阳性细胞数增加,表明通过增加Livin表达,可对细胞凋亡产生抑制作用,减轻神经元的丢失。本研究发现,模型组VD大鼠Livin含量降低,与谭家泽的临床试验结果相一致。进一步观察发现,与模型组比较,埋线组可以提升VD大鼠异常降低的血清Livin含量,缓解海马神经元细胞损伤。
穴位埋线疗法属于针灸疗法的一个分支,是经络理论与现代医学手段相结合的产物,是在中医理论指导下,采用不同型号的羊肠线,根据需要有选择地埋入穴位,通过羊肠线对穴位的持续刺激作用,达到治疗疾病的一种外治方法,已经广泛应用于临床各科[9]。由于VD是一种需要长期治疗的疾病,目前针刺疗效肯定,而穴位埋线每20~30 d治疗1次,故避免需较长时间每日针刺的痛苦,使家属及患者更能坚持长期的治疗,所以穴位埋线不失为一种较为切实的治疗方法。中医认为,痴呆病人多属本虚标实,气虚血瘀。气虚则神失所养,瘀血则可随经脉流行入脑,与精髓错杂,致使清窍受蒙,灵机呆钝而出现神识不清,表情痴呆诸症。笔者选取百会、膈俞、气海、三阴交(双)、膻中组成益气活血方。百会为诸阳、百脉之会,可开窍醒神、回阳固脱。膈俞有开胸通膈治疗气滞血瘀之功。气海培补元气。三阴交可健脾益气,调补肝肾。膻中为气会,有理肺气、通乳络之功。以上五穴共同组合,共奏益气活血之功。本实验以此为基础,运用穴位埋线治疗实验性VD大鼠,观察大鼠血清Livin含量变化与埋线治疗的疗效关系,为临床运用穴位埋线治疗VD提供一定的理论依据。
Morris水迷宫已经广泛地用于动物空间学习记忆研究的实验。空间学习记忆是检测动物空间方向、反射时间、视知觉和结构应用等能力,从而评价其认知水平的一种行为模式,是一类关于场景和事件的学习记忆,因能较好地检测到实验动物的空间学习记忆功能,并有排除动物在完成作业而经过的途中所留下的排泄物和所分泌的外激素对其它动物作业成绩产生影响等优点,因而在国内外被广泛采用[10]。本实验采用经典的4-VO建立VD模型。结果发现,模型组大鼠找到站台的时间比对照组大鼠明显延长;第7天撤去站台后,VD模型组大鼠第Ⅲ象限游泳时间和穿越站台次数比对照组明显减少,结果表明,模型组大鼠学习记忆能力较对照组明显减退,应用4-VO改良法成功复制了VD模型大鼠。采用穴位埋线治疗后,大鼠找到站台的时间较VD模型组明显缩短,学习记忆成绩接近对照组,提示穴位埋线能有效改善VD大鼠的学习记忆能力。
结果显示,VD模型组血清Livin显著低于假手术组,穴位埋线组与VD模型组相比,具有显著性差异(P0.05)。病理结果显示,VD模型组海马CA1区神经元严重受损,导致学习记忆能力降低,穴位埋线组海马CA1区神经元恢复良好,无严重变性和坏死,说明穴位埋线可缓解脑缺血性损伤的神经细胞凋亡,从而改善学习记忆。本研究结果表明,提升血清Livin含量,缓解脑缺血后细胞凋亡,减轻海马神经元的损伤,可能是穴位埋线改善痴呆症状的机理之一。
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【关键词】 噪声
【Abstract】 AIM: To study the effects of combined stress of noise and moderate +Gz on learning and memory in rats. METHODS: Thirtytwo male SD rats were randomly pided into four groups with 8 rats in each group: control group, +6 Gz/3 min group, 90 dB(A)/30 min noise group, +6 Gz/3 min and 90 dB(A)/30 min noise combined stress group and the changes of learning and memory after stress were measured by Ymaze test and stepthrough test. RESULTS: As compared with that in control group, the percentage of right reaction decreased significantly (P0.01) and the reaction time increased significantly (P0.01) in +Gz group at 2 d, 4 d and 6 d after +Gz exposure. When compared with that in control and noise group, the percentage of right reaction decreased significantly (P0.01) and the reaction time increased significantly (P0.01) at all time points in combined stress group, but no significant changes were observed when compared with that in +Gz group. As compared with that in control group, the total time and number of error increased significantly (P0.01) while latent time decreased significantly immediately and 6 days after stress (P0.05) in combined stress group. CONCLUSION: It is suggested that combined stress of +6 Gz/30 min and 90 dB(A)/30 min noise may cause sustained impairment of learning and memory in rats.
【Keywords】 stress; +Gz; noise; learning and memory; rats
【摘要】 目的: 探讨中等强度正加速度和噪声复合应激对大鼠学习记忆功能的影响. 方法: 雄性SD大鼠32只随机分为对照组、+6 Gz/3 min组、90 dB(A)/30 min噪声组、+6 Gz/3 min和90 dB(A)/30 min噪声复合应激组4组,每组8只. 采用Y型迷宫实验和避暗实验观察应激后不同时间大鼠学习记忆功能的变化. 结果: +Gz组大鼠正确率在暴露后2, 4和6 d较对照组均显著下降(P
【关键词】 应激;正加速度;噪声;学习记忆;大鼠
0引言
军事飞行特殊的工作环境,使战斗机飞行员不可避免地暴露于各种应激源,其中两种较为常见的航空应激源为正加速度(+Gz)和噪声,已成为威胁飞行安全的重要因素. 故探讨其复合应激作用对飞行人员工作能力的影响及其机制具有重要的现实意义. 我们以往的研究工作表明, 高G(+10 Gz/3 min)和90 dB(A)/30 min噪声复合应激可引起大鼠持续性学习记忆功能障碍,其中以高G为主要影响因素[1]. 然而在实际飞行过程中,战斗机飞行员可以通过自身对飞行动作及飞机姿态的调整,得以部分地避免过高G值的产生,因此实际通常暴露于中等强度(+6 Gz左右)的正加速度之下. 但有关中等G值的+Gz和噪声复合应激作用对大鼠学习记忆功能的影响报道较少. 本研究我们旨在探讨+6 Gz/3 min和90 dB(A)/30 min噪声复合应激后大鼠学习记忆功能的变化规律.
1材料和方法
1.1材料
雄性SD大鼠32只(第四军医大学实验动物中心提供),体质量(165±10) g. 实验前先在实验环境下饲养1 wk,使其适应实验环境,排除惊吓、环境等因素对大鼠学习和记忆的影响. 将大鼠随机分为对照组、噪声组、+Gz组和复合应激组4组,每组8只.
1.2方法
1.2.1加速度和噪声作用方式采用动物离心机进行+Gz暴露,动物离心机的半径为2 m,可模拟的正加速度范围为+1~+12 Gz,由计算机进行加速度程序控制. 利用自制的有机玻璃盒(容积为15 cm×5 cm×3 cm)承载大鼠,并水平固定于离心机的转臂上,大鼠头部朝向离心机旋转轴心. 噪声由UZ3型白噪声发生器(北京长城无线电厂)产生. +Gz组大鼠G值暴露水平为+6 Gz,峰值作用时间为3 min,加速度增长率为1 G/s. 噪声组大鼠噪声暴露水平为90 dB(A),频率1000 Hz,作用时间为30 min. 复合应激组大鼠噪声作用条件同噪声组,从噪声作用的第27分钟开始复合+6 Gz暴露3 min,加速度作用条件和+Gz组相同. 对照组大鼠仅放置于有机玻璃盒中3 min,不进行+Gz和噪声暴露.
1.2.2Y型迷宫实验Y型迷宫即三等分辐射式迷路箱,由三个支臂和一个连接区组成,三臂相互间夹角为120°,每臂长40 cm,宽15 cm,底部铺以直径为5 mm、间距为6 mm的铜棒[2]. 各臂末端装有信号灯,信号灯打开指示该臂为安全区,即该臂底部不通电. 安全区的方位按照ACB变换,当某臂为安全区时,另两臂和连接区均带有刺激电压. 实验在安静、光线较暗的环境中进行. 实验开始时,将大鼠放入迷宫的B臂中,使其适应环境1 min,然后通电,A灯亮,经过5 s的延时后,不亮灯的两臂及连接区开始通电,电击电压为40 V. 此时灯光仍持续60 s,然后熄灯,即完成一次测试. 每次实验进行15次测试,记录大鼠的正确率和反应时. 反应时为安全臂亮灯开始到大鼠到达安全臂所用时间. 分别记录不同应激后即刻、2, 4和6 d的成绩.
1.2.3避暗实验实验箱由明、暗两个箱子组成,箱底铺以铜网,暗箱通以40 V交流电. 暗箱与明箱相连的壁中央有洞,大鼠可以自由通过[3]. 首先将大鼠放入明箱中,由于其钻洞及趋黑本性,则钻入暗箱中,大鼠因遭受电击而逃回明箱中,此即为一次学习. 以大鼠在明箱中停留时间超过5 min为学会. 记录大鼠在应激后即刻及6 d时学会所用的总时间、潜伏期和错误数.
所有实验时间为每日上午8:00~12:00,在同一环境相似的条件下进行.
统计学处理: 所有数据以x±s表示,采用SPSS 10.0 for windows对Y型迷宫实验结果进行重复测量方差分析,对避暗实验结果进行非参数秩和检验.
2结果
2.1正确率和反应时的变化+Gz组大鼠正确率在暴露后2,4和6 d时较对照组均显著降低(P
+Gz组大鼠反应时在暴露后2 ,4和6 d时较对照组均显著延长(P
2.2总时间、潜伏期和错误数的变化在暴露后即刻,+Gz组和噪声组大鼠的总时间、潜伏期及错误数较对照组均无显著性差异,而复合应激组大鼠总时间和错误数均显著增加(P
3讨论
随着新一代高性能战斗机的装备,飞行员已较以往任何时候都更加频繁的暴露于各种不良的航空应激因素之下,其中最为常见且危害较大的就是正加速度和噪声. 其对飞行人员智力水平和工作能力的不利影响已逐渐引起航空医学工作者的高度重视. 本研究我们采用Y型迷宫、避暗实验等行为学实验方法,观察了中等强度的正加速度和噪声复合应激后大鼠学习记忆功能的变化情况,发现+6 Gz/3 min和90 dB(A)/30 min噪声复合应激可引起大鼠持续性学习记忆功能障碍.
正加速度对脑的影响一直受到国内外学者的普遍关注. 围绕高G值暴露后脑组织病理学变化开展了大量实验工作,观察了高G值后脑组织形态的变化,系统地揭示了高G暴露致脑损伤的性质、时程及其机制[4,5]. 在此基础上,又进一步探讨了正加速度对脑功能的影响[1,6]. 韦应波等[6]采用Y型迷宫、旷场分析实验和避暗实验等行为学试验方法,观察了不同强度和作用时间的+Gz暴露后,大鼠的记忆功能和行为学的变化情况,发现+10 Gz/3 min暴露可引起大鼠暂时性记忆保持功能障碍,但+6 Gz/3 min暴露后大鼠的记忆功能无明显变化. 本实验结果显示,+6 Gz/3 min组大鼠正确率在暴露后2, 4及6 d均显著降低,反应时均显著延长,表明+6 Gz/3 min暴露可引起大鼠学习功能持续性降低. 以上结果提示,虽然学习功能与记忆功能是密切相关的两个脑功能,但是在+Gz暴露后,学习和记忆两个功能的变化可能存在某种差异,学习能力的改变较之记忆功能可能对缺血缺氧改变更敏感,即学习功能更易受到+Gz暴露的影响. 其原因可能是由于在学习过程中达到学会程度需要形成长期记忆,而长期记忆需要有新的蛋白质分子的合成,这可能与脑内某些永久性的功能和结构变化有关,+Gz暴露导致的暂时性脑缺血缺氧变化抑制了大鼠的神经细胞的正常活动,从而可能使短期记忆向长期记忆的转化过程受阻,从而表现为大鼠学习能力的减退. 而经过训练达到学会程度的大鼠,已经形成了相应的长期记忆,即脑部相关脑区已经发生了某种结构变化,所以大鼠的记忆能力在其后的+ Gz暴露后得到了较好保持.
噪声暴露对人工作能力的影响,一直是公共卫生医学和职业医学的重要研究课题之一. 国内外学者曾采用多种行为学实验方法,研究了不同噪声暴露强度和暴露时间下人和动物学习记忆功能的变化,发现80~96 dB的噪声暴露30 min可引起人和动物学习记忆功能障碍[7,8]. 多数学者认为噪声主要影响学习能力和短时记忆,而对长时性记忆没有影响或影响较小. 本实验结果表明,噪声组大鼠正确率仅在暴露后即刻显著降低,暴露后2 d时已基本恢复,提示90 dB(A)噪声暴露30 min可引起大鼠暂时性学习记忆功能降低. 实验结果与以往的报道相一致[7,8]. 其机制可能为,在噪声作用下,噪声信息被投射到大脑皮层广泛区域,并使其超过正常兴奋程度,从而使电击造成的痛觉信息不能或减弱与控制产生回避反应的有关皮层建立暂时性联系,致使动物学习能力降低[9].
战斗机飞行员在飞行中常常暴露于正加速度和噪声等多种不良环境因素之下,但有关正加速度和噪声复合应激对学习记忆的影响鲜有报道. 本实验结果表明,正加速度和噪声复合应激组大鼠在暴露后各时间点正确率均显著降低,反应时均显著延长,总时间和错误数显著增加,潜伏期显著缩短,提示+6 Gz/30 min和90 dB(A)/30 min复合应激可以引起大鼠严重的持续性学习记忆功能障碍. 在正加速度和噪声同时作用下,两种应激因素具有一定的协同效应,复合应激较之单纯正加速度或噪声对大鼠学习记忆功能的影响在损害程度和持续时间上都有一定程度的加强.
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